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人抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)ELISA试剂盒

简要描述:人抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)ELISA试剂盒提供免费代测服务:使用我公司试剂盒,只收取试剂盒的费用,其他辅助试剂全部免费。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2016-05-09
  • 访  问  量:692
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详细介绍
本公司多年专业酶免服务,质量保证,可免费提供代测服务,一周内出结果。咨询订购:人抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)ELISA试剂盒
    试剂盒组成:48孔/96孔
    :021—60449724,
    保存:2-8℃
    主要用途:科研检测
    *:   人抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)ELISA试剂盒 
    样本要求
    1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。
    2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
    3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。
    标本的采集及保存
    1. 组织匀浆: 将动物的组织标本先用PBS洗涤,去除多余血液,匀浆化后放在20mlPBS中于-20° C放置过夜,第二天,经过二次反复冻融破膜,将匀浆物5000x g离心5分钟,取上清即可检测。
    2. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
    注:以上标本置4℃保存应小于1周,-20℃或-80℃均应密封保存,-20℃不应超过1个月,-80℃不应超过2个月;标本溶血会影响zui后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测;高血脂的标本不需进行特殊处理,可直接检测。
    操作步骤
    实验开始前,请提前配制好所有试剂;试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,均应用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。建议各实验室在操作前先进行预实验以建立*稀释倍数。
    1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100ul,余孔分别加标准品或待测样品100ul,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
    为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
    2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100ul(在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
    3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350ul/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
    4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100ul,37℃,60分钟。
    5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350ul/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
    6. 依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
    7. 依序每孔加终止溶液50ul,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
    8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后立即进行检测。
    注:
    1. 每次实验留一孔作为空白调零孔(不同于空白孔),该孔不加任何试剂,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
    2. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室 温。使用后立即冷藏保存试剂。
    3. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入检测溶液B或底物前确保尽量吸干孔内液体。为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,避免酶标板长时间处于干燥状态。
    4. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
    5. 在储存和温育时避免强光直接照射。
    6. 未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,请精确配置标准品及工作液,尽量不要 微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10ul),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;检测液A、B,以及底物溶液在使用前,应置于37℃温育 30分钟;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
    7. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
    洗板方法
    手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水
    纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需
    要,重复此过程数次。
    自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
    特异性
     本试剂盒可同时检测重组或天然的人Talin,且与其它相关蛋白无交叉反应。
  提供免费代测服务:使用我公司试剂盒,只收取试剂盒的费用,其他辅助试剂全部免费。
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