人免疫球蛋白重链（IgH）ELISA试剂盒

简要描述：在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。

产品型号：
厂商性质：生产厂家
更新时间：2016-07-14
访问量：872

产品咨询联系我们

产品目录/ PRODUCT MENU

相关文章/ ARTICLES

详细介绍

上海恒远生物科技有限公司
    ：

    021—60449724


    传真： 86-
人免疫球蛋白重链（IgH）ELISA试剂盒酶联免疫法
    样品形式：血清/血浆/细胞培养上清/其它生物液体（具体情况请咨询）
    保存与运输：短期4℃/长期-20℃保存
    应用范围：科研用检测试剂
    试剂盒操作步骤
    实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。加样时，枪头应直接对准液面，切勿沿孔壁加样。
     加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
    为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
     弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
     温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，200μl/每孔，甩干。
     每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液）100μl，37℃，60分钟。
     温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，200μl/每孔，甩干。
     依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔显色不明显，即可终止）。
     依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
     用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后15分钟以内进行检测。
    实验备注
     用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。
     每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是zui后加底物溶液及终止液。测量时先用此孔调OD值至零。
     为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。
     未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液、或辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。
     建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
    洗板方法
    手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。
    自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
    试剂盒计算
    以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
    注意事项
     当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。
     洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。
     一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
     请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。
     如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数。
     在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。
     底物请避光保存。
     不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。
     试剂盒保存：未开封的试剂盒应储存于2-8℃；开封后的酶标板应与干燥剂一起储存于铝箔袋中置于2-8℃保存。仅在此出储存条件下，产品在有效期内可正常使用。
     浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
     刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
    在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。

人免疫球蛋白重链（IgH）ELISA试剂盒

产品咨询

上一产品：人可溶性血管内皮生长因子受体2（VEGFR-2/sFLK-1）ELISA试剂盒
下一产品：人免疫球蛋白重链可变区（IgHV）ELISA试剂盒

人免疫球蛋白重链（IgH）ELISA试剂盒

留言框

产品：

您的单位：

您的姓名：

联系电话：

常用邮箱：

省份：

详细地址：

补充说明：

验证码：

恒远客服小吴

恒远客服小孙

恒远客服小冯