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人肺癌标志物ELISA试剂盒

简要描述:人肺癌标志物ELISA试剂盒,Elisa试剂盒/葡聚糖凝胶/血清细胞/抗体,上海恒远生物提供各种属Elisa试剂盒,生化试剂,抗体抗原,标准品。产品齐全,质量保证,在业界及师生间有着良好的声誉。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2016-09-28
  • 访  问  量:220
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详细介绍

中文名称:人肺癌标志物ELISA试剂盒
    :021—60449724, 
    规格:96T/48T 
    【检测范围】:100pg/ml→1.56pg/ml。 
    【敏感性】: <0.2pg/ml 
    【特异性】: 系统和其它细胞因子无交叉反应。 
    【保存】: -20℃ [短期内(如两周)可4℃ 
    【有效期】: 12个月(-20℃)。 
    【用途】: 用于体外定量分析液体标本(通用型)。 

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    【需要而未提供的试剂和器材】 
    1. 37℃恒温箱。 
    2. 标准规格酶标仪。 
    3. 自动洗板机。 
    4. 单通道或多通道可调节移液器以及其吸头。 
    5. 蒸馏水,容量瓶等 
    6. 干净的试管和Eppendof管。 
    【注意事项】 
    1. 从-20℃取出的试剂盒,在4℃解冻过夜。盒内每一瓶解冻的溶液在开启瓶盖之前都要轻轻摇匀,避免解冻时出现的分层,否则会出现浓度不均一的现象。 
    2. 开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。 
    3. 配制各种试剂时,切记混匀! 
    4. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。 
    5. 建议所有人IL-1β标准品、样本都做双份检测。 
    6. 要严格避免操作过程中酶标板干燥。干燥会使酶标板上生物成份迅速失活! 
    7. 为免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和试管。 
    【洗板方法】 
    手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的PBS或TBS洗涤缓冲液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。 
    自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。 
    【样品的准备和保存】 
    样品如果不立即分析,应分装后冷冻保存,且避免反复冻融。 
    血清——用干净试管收集血液,室温凝固2小时或4℃过夜,离心1000×g 10分钟,收集血清。立即分析或分装后-20℃冷冻保存。 
    细胞培养、组织匀浆、体液——离心去除沉淀,立即分析或分装后-20℃冷冻保存。 
    【样品稀释的一般原则】 
    用户须查阅文献了解标本内待测因子的含量,决定适当的稀释倍数,以使稀释后样品中待测因子的浓度处于ELISA试剂盒的*检测范围。样品的稀释应有详细记录。 
    【试剂的准备和保存】 
    A. 人IL-1β标准品的稀释和使用:在使用前2小时内准备。将冻干品管内加入1ml样品稀释液,彻底溶解后做倍比稀释。 
    稀释后的人IL-1β标准品在2小时内使用。 
    B.生物素标记人IL-1β抗体工作液:在使用前2小时内准备。 
    1. 根据每孔需要0.1ml计算总的用量(实际配制时应多配制0.1-0.2ml)。 
    2. 按10ul生物素标记人IL-1β抗体加人IL-1β抗体稀释液990ul的比例配制工作液。轻轻混匀。 
    C.亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)工作液的准备:在使用前1小时内准备。 
    1. 根据每孔需要0.1ml计算总的用量(实配时应多配制0.1-0.2ml)。 
    2. 按10ul亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)加ABC稀释液990ul的比例配制工作液。轻轻混匀。 
    D. TMB显色工作液的准备:在使用之前30分钟,按TMB显色液A 9份加 TMB显色液B 1份的比例配制TMB显色工作液。 
    【操作程序】 
    1. 确定本次检测所需的已包被人IL-1β抗体的酶标板孔数目。 
    2. 将倍比稀释的人IL-1β标准品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加样品稀释液的作为对照。处理后的标本按100ul每孔加入。 
    3. 酶标板加上盖,37℃反应90分钟。 
    4. 反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体;或甩去酶标板内液体,再对着吸水纸拍几下。洗涤2次。 
    5. 将准备好的生物素人IL-1β抗体工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反应60分钟。 
    6. 0.01M TBS或0.01M PBS洗涤3次,每次浸泡1分钟左右。 
    7. 将准备好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反应30分钟。 
    8. 0.01M TBS或0.01M PBS洗涤5次,每次浸泡1-2分钟左右。 
    9. 按每孔0.1ml依次加入TMB显色工作液,37℃避光反应,反应过程中,要经常的观察,当肉眼可见人IL-1β标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔差别不明显时,即可加入TMB终止液0.1ml/孔。(显色反应zui长不要超过30分钟)。 
    10. 用酶标仪在450nm测定O.D.值。 
    11. 根据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度。用户也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了N倍,其实际浓度应该×N。 
    【操作程序总结】: 
    准备试剂,样品和人IL-1β标准品 
    加入准备好的样品和人IL-1β标准品,37℃反应90分钟 
    洗板2次,加入生物素化人IL-1β抗体工作液,37℃反应60分钟 
    洗板3次,加入ABC工作液,37℃反应30分钟 
    洗板5次,加入TMB显色液,37℃反应 
    加入TMB终止液 
    30分钟之内读OD值 
    计算标本待测因子含量 
    人肺癌标志物ELISA试剂盒上海恒远生物公司保证质量,供应RD,本试剂盒科研,提供代测服务,咨询。

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