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还记得上周五,我公司新闻资讯中公布与浙江大学合作成功的喜讯。我公司服务完善,提供售前售后技术知道服务,昨日下午,该大学陈老师致电我司业务员咨询ELISA的检测要点。根据陈老师的问题描述,业务员转到公司技术部,我司技术员给陈老师去dian话解析道:
一、检测抗原
常用于检测抗原的方法是非竞争性的双抗体夹心法,其次是竞争法。但竞争法在具体实验中有些困难,特别是检测微生物的抗原,因为需要标记抗原,这对于某些抗原是很难做到的,甚至是不可能的。另外在竞争法中,酶标记的抗原与标本直接混合在一起,许多标本中含有酶抑制剂或蛋白A样物质,可影响ELISA的结果。
二、检测抗体
检测抗体种类常用的方法是检测抗体种类的捕获法,这个方法常用于检测特异性IgG、IgA、IgM。这个方法的步是捕获所需要检测的一个种类的抗体,接下来是检测捕获的抗体是否是特异性抗原的抗体。间接ELISA在检测IgG时比较简单,但不适用于检测其他种类的抗体,因为血清中如果有特异IgG存在将与IGM或IgA等竞争结合抗原。
三、竞争法检测抗体
① 将标记的抗体和标本同时加入反应孔内,但标记的抗体和标本中的抗体必须是结合抗原的不同决定簇;
② 先加标本,冲洗后再加标记的抗体。竞争法检测抗体比间接法容易判断结果,并且比较敏感和特异。
不论选择哪种方法,都包括6个步骤:1.抗原或抗体吸附于固相;2.加标本和试剂;3.孵育和冲洗;4.加酶标抗原或抗体;5.加适当的底物;6.检测和分析结果。
问题解决后,陈老师再次致电给我司业务员,夸赞我司服务好,技术专业。
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