台盼蓝细胞染色原理详细解答

　　步骤：（来自supergama）
　　1、4%台盼蓝母液：称取4g台盼蓝，加少量蒸馏水研磨，加双蒸水至100ml，用滤纸过滤，4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。（也可买Gibco的成品）; T$ d& \! h% l, E） Z） A- W
　　2、胰酶消化贴壁细胞，制备单细胞悬液，并作适当稀释。
　　3、染色：细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。（终浓度0.04%）
　　4、计数：在三分钟内，分别计数活细胞和死细胞。 1 e7 e* I* S） ^% X8 U$ K- _
　　5、镜下观察，死细胞被染成明显的蓝色，而活细胞拒染呈无色透明状。
　　6、统计细胞活力：活细胞率（%）= 活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×100%
 
细胞损伤或死亡时，台盼蓝可穿透变性的细胞膜，与解体的DNA 结合，使其着色。而活细胞能阻止染料进入细胞内。故可以鉴别死细胞与活细胞。严格来说，台盼蓝染色检测的是细胞膜的完整性， 通常认为细胞膜丧失完整性，即可认为细胞已经死亡。这被称为染料排除测试。通过显微镜很容易就能识别出死亡的被台盼蓝染色的细胞，并可使用细胞计数器进行计数。

机理：正常的活细胞，胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡。因此，借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中zui常用的死细胞鉴定染色方法之一。
　　保存条件
　　室温保存
　　说明
　　有潜在致癌危险