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抗体的选择和保存指南

更新时间:2020-07-22浏览:1814次

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    今天给大家分享一篇关于抗体的选择与保存,搬起小板凳快来围观吧!

    一、抗体的稳定性
    1. 抗体的稳定性是自然界长期进化的结果。抗体是免疫系统中重要的分子之一,其稳定性是自然进化筛选的结果。在众多物种中,抗体分子形成了保守而稳定的结构。
    2. 抗体分子的高Tm值。在室温下,甚至短时间温度达到50-60℃,抗体分子都能维持正确折叠,保持应有的活性。
    3. 抗体的纯度。采用先进的抗体纯化技术,确保抗体产品的高纯度,保障其抗体产品的稳定性。
    4. 抗体的浓度。高浓度的抗体产品可减少容器表面吸附造成的物质损失,高浓度的抗体稳定性更好,抗体产品中93%的浓度大于0.5mg/ml。
 
    二、怎样确定抗体购买渠道和品牌?
    国外著名抗体品牌的质量一般没问题,但价格较贵,而且很多抗体品牌本身不生产抗体,所以能找到OEM抗体生产商生产的*抗体。
 
    三、怎样保存已获得的抗体?
    抗体无论是保存还是运输都应尽可能地避免反复冻融,收到抗体后请根据实验的需要,对抗体进行分装,避免同一管抗体反复冻融(反复冻融会导致抗体空间结构变 性,导致多聚体形成,从而降低抗体的结合能力)。抗体保存得当与否,直接决定了抗体的活性和使用效果,如果抗体保存得当,抗体活性大部分都可以维持数年。 请谨记,无论何时请按照说明书推荐的保存条件正确处理和保存抗体。

    1. 收到抗体后,请务必在4℃,12000rpm,离心3分钟,(无论是液体还是冻干粉状态),再打开管盖进行分装和保存(如果抗体体积小于50ul,请延长 离心时间至5分钟,以保证全部抗体均离心下来)。抗体一般使用特制的储存管,只有在12000rpm离心3分钟,才能将附着在管壁或盖内的抗体全部离心下 来(即使是在10000rpm离心也会离心不*,导致出现抗体的量不足的现象)。

    2. 对于ProSci大部分抗体,比较合适的保存方式是,分装后保存在-20℃或者-80℃。
    (1)对绝大多数抗体来说,保存在-20℃就*足够了,没有任何证据显示保存在-80℃会更好。
    (2)分装可以Most程度的降低反复冻融对抗体活性的损害,同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体造成的污染可能性。
    (3)分装的量以一次实验用完为好,少不能少于10ul每份。因为分装体积越小,抗体的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响。
    (4)复融后的分装抗体如果一次用不完,将剩余母液保存在4℃,避免再冻起来。
    (5)抗体工作液应该当天配制当天用完,4℃保存尽量不要超过1天。
    (6)避免将抗体保存在自动除霜冰箱中,将抗体保存在冰箱里层,避免温度变化造成反复冻融。
 
    3. 大部分抗体收到后4℃短暂保存1~2周对抗体活性没有影响。

    4. 大部分抗体的运输条件:一般的运输过程需要1~2周的时间,所以是在低温4℃的条件下来完成的。

    4℃运输主要的目的是为了避免反复冻融对抗体活性的损害(如果使用干冰运输,那么收到时抗体是冻起来的,为了分装就需要解冻,这就多了一次冻融的过程),所以运输过程中避免干冰运输。

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