上海恒远分享Elisa测定结果分析方案

    日前上午，我公司吴收到中国药科大学黄老师发来的会话。黄老师表示：Elisa试剂盒的检测结果不理想，不知道是哪里出了问题。帮我看下是什么原因，我自己合成8个氨基酸的抗原短肽，和BSA耦连后免疫动物，1个月后用ELISA测定血清中针对抗原短肽的抗体滴度，具体步骤：用碳酸缓冲液溶解抗原短肽后包板，4度冰箱18小时，再用1%OVA37度封闭2小时，洗板3次。待测血清用10%小牛血清倍比稀释，37度温育1小时，洗板3次，加入二抗，37度温育40分钟，洗板3次，加TMB显色，结果比较诡异，阴性对照也显色了，且OD值和阳性差别不大。是什么原因呢？是洗板的问题吗？
    吴将问题转至技术部，上海恒远生物公司专业技术员回应，ELISA结果不理想原因可以根据这几个方面分析：
    1.洗板是否串孔，如串孔的话可能造成污染；您一抗、二抗每次洗板时洗5遍以上。
    2.封闭液的问题，你说阴性对照也显色了，那zui主要的问题应该是封闭，应重新考虑用OVA封闭是否适合，如果OVA封闭效果不好的话可以选择其他的封闭液。封闭液的选择园子里有很多相关的帖，你搜一下看看。
    3.建议ELISA试剂盒包被在37度两小时，这样的效果可能会好一些。
    上海恒远生物公司为您提供R&D、TSZ品牌Elisa试剂盒，设备齐全，种属涉及人、大鼠、小鼠、猪、鸡、植物等。保证质量，*，提供全程技术指导服务，欢迎您致电我司吴咨询。