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蛋白磷酸化是一种非常重要的翻译后加工,做信号通路必然是要检测蛋白磷酸化的,Westernblot是评估蛋白磷酸化状态的常用方法,其实和跑正常蛋白没什么出入,只不过孵育的是识别磷酸化的抗体。下面恒远生物带大家总结一下实验中的注意要点。一、关于磷酸化蛋白样品裂解液问题蛋白的磷酸化是一个非常迅速的反应,取样品的过程要迅速,样品要新鲜,样品处理最好在冰上操作,操作时间尽量短。用PBS洗涤细胞时,PBS一定要4℃预冷。如果是组织的话,提取蛋白时采...
抗体(antibody,Ab)是机体在体内存在的外来分子、微生物等抗原物质刺激下,由B淋巴细胞或记忆细胞增殖分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白(immunoglobulins,Ig),主要分布在血清中,也分布于组织液及外分泌液中。一、抗体分子的基本结构抗体由四条多肽链组成,即两条相同的相对分子质量较小的轻链(lightchain,L链)和两条相同的相对分子质量较大的重链(heavychain,H链)借二硫键连...
原代细胞(primarycell)是指从机体的组织中经蛋白酶或其它的方法获得、并在体外进行培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞、细胞系和细胞株的区别细胞系(cellstrain):原代培养物经传代成功后即为细胞系,由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限,可称为有限细胞系,如可以连续培养,则称为连续细胞系,培养50代以上并无限培...
在ELISA检测系统的关键要素中,包被原的性质很重要,蛋白浓度,是否降解,这关系到你做出的抗体可不可以被其识别,所以保留抗原很重要,elisa试剂盒我做重组蛋白时,一定要在冰浴下缓慢融化就是这个道理。操作注意:(1)试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶溶解后再使用。(2)实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。(3)严格按照说明书中标明的时间、加液...
【文献标题】TheinterplayofCxcl10+/Mmp14+monocytesandCcl3+neutrophilsproactivelymediatessilica-inducedpulmonaryfibrosis【作者】DeminCheng,WenxiuLian,TingWanget.al【作者单位】南京医科大学(NanjingMedicalUniversity)【文献中引用产品】小鼠肝素结合性表皮生长因子(HBEGF)EL...
品牌:恒远生物货号:HYCC30031中文名称:大鼠胚胎心肌细胞规格:T25形态特性:上皮样细胞生长生长特性:贴壁生长培养条件:DMEM+10%FBS传代方法:1:2~1:6传代;2~3天换液1次。冻存条件:无血清细胞冻存液特征特性:该细胞由KimesB和BrandtB从BD1X大鼠胚胎心脏组织的克隆细胞株亚克隆得到;表现出许多骨骼肌的特性。这个细胞株中的成肌细胞能融合形成多核的肌管,并对乙酰danjian的刺激发生反应。如果培养基中的...